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详细介绍
| 品牌 | BIOHUB | 供货周期 | 现货 |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 作为抗体反应等的印迹封闭溶液使用 | 应用领域 | 生物产业,制药 |
western blot中脱脂奶粉的作用
封闭
原理：用非抗原的蛋白去封闭膜的蛋白质结合位点，避免标记抗体固定在膜上引起背景增高，常用的封闭液有BSA,脱脂奶粉,明胶, tween-20等,一般脱脂奶粉。
实验步骤：
5%脱脂奶粉（用1x TBS配制，或1xTBST配制）封闭一晚上 或室温1~2小时
当一抗为抗磷酸化抗体时，脱脂奶粉由于含有较多磷酸化蛋白，请改为使用BSA。
2，一抗、二抗孵育
原理： 一抗可以与要检测的蛋白特异结合，二抗可与一抗结合，同时二抗上带有特异的酶（如辣根过氧化物酶HRP，碱性磷酸酶法AP等 ),标记酶可以分解化学显色底物产生有颜色的条带或催化化学发光底物使胶片感光。
实验步骤：
一抗孵育：5%脱脂奶粉稀释一抗到合适的浓度，与膜室温孵育1小时或4度一晚上（抗体浓度及孵育时间需根据不同的抗体做相应调整， 1xTBST，洗膜3次，每次5分钟。
二抗孵育：5%脱脂奶粉稀释二抗到合适的浓度，与膜室温孵育1小时， 1x TBST,洗膜3次，每次5分钟。
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