脂质体转染试剂

脂质体转染试剂 6G，是一种新型多功能的阳离子脂质体转染试剂。适合于将核酸(DNA和RNA)转染入真核细胞，具有低细胞毒性；对多种类型的细胞和培养板都具有高转染效率；转染时血清的存在不影响转染效率的优点。经证明可以将各种有效载荷有效地转染到各种贴壁和悬浮细胞系中。研究人员将 Lipofectamine 6G 试剂用于质粒 DNA 转染以及基于 siRNA 和 shRNA 的基因敲除实验、基因表达研究。

2-4℃保存，有效期⼀年。（避免冷冻）

产品应用及说明

质粒DNA的转染对大多数细胞来说，DNA(µg)与Lipofectamine 6G (µl)的比例为1:2~1:3。转染时高的细胞密度可以得到高的转染效率和表达水平，并能减少细胞毒性。      1. 以24孔板为例      贴壁细胞： 转染前一天，用500 µl不含抗生素的培养基接种0.5～2×105细胞，使之第二天能达到70-90%汇合。      悬浮细胞：在准备Lipofectamine 6G复合物之前，用500 µl不含抗生素的培养基接种4～8×105细胞即可。      2. 对每个转染样品，进行以下操作      a. 在eppendorf管里分别加入50 µl Opti-MEM I ReLipced Serum Medium和0.8 µg DNA轻柔混匀，制成DNA稀释液。      b. 在另一个eppendorf管里分别加入50µl Opti-MEMI ReLipced Serum Medium和2.0 µl Lipofectamine 6G (注意用前先混匀)，轻柔混匀，制 成Lipofectamine 6G 稀释液，室温静置5分钟。c. 将DNA稀释液和Lipofectamine 6G稀释液混合,轻柔混匀,室温静置20分钟,形成Lipofectamine 6G复合物。Lipofectamine 6G复合 物在室温下可稳定存在6小时。3. 将Lipofectamine 6G复合物加入到接种好的细胞中，将培养板轻轻地前后摇动，使复合物分散均匀。4. 在37℃ CO2培养箱中培养4-6小时后更换培养基,继续培养18～48小时。5. 如果要筛选稳定细胞株，则在转染24小时后将细胞按照1:10或更高的比例接种到新鲜培养基中，第二天加入选择性培养基进行筛选。备注：质粒DNA转染的优化 为达到最高的转染效率和降低细胞毒性的影响，可以对DNA和Lipofectamine 6G的比例以及细胞密度进行优化，一般在1:0.5~1:5的范围内优化DNA (µg)和Lipofectamine 6G (µl) 的比例。