自备苏木素分化液(推荐 78NB10002)、苏木素返蓝液(推荐 78NB10003)、二甲苯、梯度乙醇、无水乙醇、中性树 胶等。
1.样本前处理
(1) 对于石蜡切片:切片依次经二甲苯脱蜡 10 min,更换新鲜的二甲苯脱蜡 10 min,无水乙醇 5min,新 鲜无水乙醇 5 min,90%乙醇 5 min,75%乙醇 5 min,自来水洗。
(2) 对于冰冻切片:-20℃保存的冰冻切片需静置 5-10 min 恢复至室温。
2. 苏木素染色
上述处理好的切片,直接进入苏木素染液染色 3-5 min,自来水洗;再经苏木素分化液 2-5 s,自来水 洗;苏木素返蓝液返蓝 2-5 s,自来水冲洗。镜下观察细胞核呈蓝色,组织背景近乎无色。然后切片依次经 70%、80%、95%、100%乙醇脱水,各 3 min 左右。切片再经新鲜无水乙醇脱水 3 min,二甲苯透明 5 min, 更换新鲜的二甲苯再透明 5 min。最后用中性树胶封片。 注:如果用于免疫组化等染色后的复染,请在其他染色完成后再进行伊红染色。
2. 染液表面有少量氧化膜为正常现象,不影响染色结果。如果染液表面出现大量氧化膜,建议更换新的 苏木素染液。
3. 操作时请穿实验服,佩戴一次性手套。