产品描述
DNase Ⅰ(无 RNase)是一种非特异性核酸内切酶,可以将单链或双链DNA同等程度进行随机水解产生具有3´ 羟基和 5´ 磷酸末端的二核苷酸、三核苷酸和寡核苷酸产物。DNase I 可以作用于单链 DNA、双链 DNA、染色质和 RNA:DNA 杂交链。 镁离子存在条件下,DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点;二价锰离子存在条件下,DNase I能将双链DNA同时切断,使DNA片段化。
不含RNase (RNase free),可以用于各种RNA样品的处理。
产品性质
来源:携带DNase Ⅰ基因的Pichia pastoris分子量:39 kDa比活:2 U/μL比活单位定义:37 ℃条件下,10 分钟内wan全降解 1μg pBR322 质粒 DNA 所需的酶量定义为 1 个活性单位存储缓冲液:20 mM Tris-HCl,50 mM NaCl,2 mM CaCl 2 , 2 mM MgCl 2 , 1 mM DTE,0.1 mg/mL Pefabloc SC,50% 甘油,pH 7.6
质量保证
SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带;
2. 酶动力学实时荧光法显示无RNA酶污染。
产品组分
组分 | 体积 |
DNase I 2U/ul | 500U/250ul ,2000U/1000ul ,10000U/5000ul |
10× Reaction Buffer | 1ml, 5ml , 20ml |
产品应用
体外转录后DNA模板的去除;
2. RT-PCR反应前RNA样品中,去除基因组DNA等可能的DNA污染;
3. Dnase Ⅰ印迹分析;
4. 与DNA聚合酶I一起用于切口平移;
5. 二价锰离子存在条件下,使DNA片段化,产生DNA随机片段文库;
6. 细胞凋亡TUNEL检测中部分剪切基因组DNA作为阳性对照。
应用实例
去除RNA 样品中污染的基因组DNA
1. 在冰上按照下列表格组分配置反应体系,注意酶的用量可根据实际需要优化;
2. 37℃孵育15~20 min;
3. 加入终浓度为 8 mM的EDTA,75℃加热10 min终止反应。
组分 | 体积 |
DNase/RNase-Free Water Up to | 50 µL |
10× Reaction Buffer | 5 µL |
Total RNA | 10-50 μg |
RNase Inhibitor | 10 U |
DNase I | 2.5~10 U |
Total Volume | 50 µL |
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运输和保存方法
干冰运输。-20℃保存,有效期一年。推荐分装保存,避免反复冻融。
1、酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上,使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
2、金属离子螯合剂,0.1% SDS,DTT,巯基乙醇等对酶有抑制作用。
4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
5、本产品主要用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
货号 | 品名 | 规格 | 品牌 |
78MRNA-1110A | 脱氧核糖核酸酶 I (DNase I) (2U/μL) | 500 U | BIOHUB |
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