肽N-糖苷酶 F说明书

更新时间：2023-10-24 点击次数：205

产品描述

PNGase F 是一种酰胺酶，切割糖蛋白上的 N-连接糖，切割的糖型有：高甘露糖、杂合和复杂寡糖，切割位点为：最内侧的 N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之间。PNGase F 还提供不含甘油的形式，便于在 HPLC 方法中取得最佳效果。

本公司 PNGase 是重组表达，并经多步纯化制备的重组蛋白。

产品特点

➢ 糖蛋白的 N-连接糖的去糖基化

➢ PNGase F 几乎可以水解糖肽/糖蛋白中所有 N-连接糖。

产品活性

活性定义

1 活性单位指在 37℃下， 1×PNGase 反应缓冲体系下，60 min 内将 10 µg 变性 RNase B 中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。糖基化RNase B分子量约 17,000 Da，去糖基后约13,683 Da。

活性测定条件

1× PNGase Buffer：糖蛋白变性缓冲液（含 0.1% SDS，10 mM DTT）、1×GlycoBuffer 2 缓冲液、1% NP-40，37℃反应 1 小时。

糖蛋白于 1×糖蛋白变性缓冲液（含 0.5% SDS，40mM DTT）中 100℃ 煮沸 10 分钟使其变性。

产品组成

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl，50 mM NaCl，5 mM EDTA，50% Glycerol，pH 7.5 @ 25°C

反应缓冲液

10×PNGase Buffer：500 mM Sodium Phosphate (pH 7.5 @ 25°C)

其它缓冲液

10×糖蛋白变性缓冲液（Glycoprotein Denaturing Buffer）：5% SDS，400 mM DTT

10×NP-40：10% NP-40。

运输与保存

干冰运输，-20℃可保存 2 年，避免反复冻融

质量控制

经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

注意事项

1、已知 PNGase F 的活性受 SDS 的抑制，所以在反应混合物中必须加入终浓度 1%的 NP-40。

2、要使天然糖蛋白去糖基化，建议增加酶量并延长温育时间。