BIOHUB无血清细胞冻存液说明书

选择处于指数生长期的细胞，按照常规方法收集贴壁细胞或悬浮细胞于离心管中。

1000 rpm-2000 rpm，离心 5 分钟，收集培养细胞沉淀，弃上清液。

加入适量 4℃预冷的 BIOHUB 无血清细胞冻存液重悬细胞，制成细胞悬液。 （按照细胞密度和所用细胞冻存管的尺寸计算所需冻存液的量，推荐冻存密度：1x10⁶ 至 5x10⁶cells/mL。）

将细胞悬液分装至已标记的冻存管中，建议每管 1mL 或 1.5mL。

在 15 mL 离心管中加入 5-10 mL 平衡至室温的wan全培养基。

从-80℃冰箱/液氮中取出冻存的细胞，立即放入 37℃水浴锅或其他细胞复苏设备中，迅速解冻。

将冻存管中的细胞悬液逐滴转移至预先准备好的含wan全培养基的离心管中，1000 rpm-1500 rpm，离心 5 分钟，收集细胞沉淀，弃上清（操作时小心，切勿将细胞沉淀移去）。

加入适量平衡至室温的wan全培养基重悬细胞，接种到事先准备好的培养容器中，轻轻摇晃培养容器，使细胞分布均匀。

镜检细胞后，可根据各自研究的需要和方法进行细胞常规培养。培养 5-24h 后，观察细胞状态，可视情况更换鲜细胞培养液。