Ec UDG酶说明书

UDG 酶可催化水解含有尿嘧啶的 DNA 链的尿嘧啶碱基和糖磷酸骨架的 N-糖苷键，释放游离尿嘧啶。本尿嘧啶 DNA 糖基酶（UDG）来源于大肠杆菌 ung 基因，经重组表达与多步蛋白纯化而得。该酶分子量为 25KDa，催化含尿嘧啶的单链和双链 DNA 释放游离尿嘧啶，对 RNA 无活性。

UDG 酶常用于止 防止 PCR 扩增产物的交叉污染，其作用原理基于：在 PCR 反应中以 dUTP 替代dTTP 掺入 DNA 中，形成了含 dU 碱基的 PCR 扩增产物，UDG 能选择性断裂单链和双链 DNA中 U 碱基的糖苷键，降解 PCR 扩增产物，消除上轮扩增产物对新样本的污染问题。由于大肠杆菌 UDG 经高温失活，降温到低温后，活性会部分恢复；因此不建议本酶用于 防止 PCR 扩增产物的交叉污染。建议利用本公司的热敏 UDG（目录号 AE0402）进行 防止 PCR 扩增产物的交叉污染。

主要应用于 PCR 扩增产物的防污染。它的作用原理基于：在 PCR 反应中以 dUTP 替代 dTTP掺入 DNA 中，形成了含 dU 碱基的 PCR 扩增产物，UDG 能选择性断裂单链和双链 DNA 中 U碱基的糖苷键，降解 PCR 扩增产物，消除上轮扩增产物对新样本的污染问题。

37℃反应条件下，每分钟催化 60 pmole 尿嘧啶碱基从含尿嘧啶的双链 DNA 上释放所需要的酶量为 1 U。

无内切酶活性：50 U 的本酶和 1 μg 的 pBR322 DNA 在 37℃下反应 2 小时，DNA 的电泳谱带不发生变化。

干冰运输。-20℃保存，有效期2年。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作！

本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

长期储存 ( 非频繁使用; 每月 1-2 次 ): -70℃；每天或每周使用: -20℃。尽量避免多次冻融，切勿暴露在温度波动较大之处。温度波动对产品的稳定性有极大影响。

UDG 可以在 PCR 反应前清除不慎污染的 U－DNA 分子，对于某个 PCR 扩增反应，整个实验室必须在所有的 PCR 反应中添加 dUTP，使所有扩增产物都成为 U－DNA。如仅某次 PCR 扩增反应使用 dUTP，T －DNA 仍积累，这个抗污染系统也难以起到wan全的作用。

UDG/dUTP 系统是 PCR 试剂专用的一种防污染措施，为了防止 PCR 产物的污染，尤其是在临检实验室中反复扩增同一片段时，必须严格规范实验室的区域划分和操作。

如果经过换房间、紫外照射、DNase 消化等措施后，依然对某个片段存在污染，建议在不同的扩增区重新设计引物，以错开污染片段。

大肠杆菌 UDG 酶的反应温度可以在 37℃－50℃ 的范围内变化，建议在 37 度反应，也可根据实验需要在 37-50 ℃范围内自由调整反应温度。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。